在大型法兰生产中，影响大型法兰的性能因素有很多，下面我们说下常见的几个因素，首先是退火温度（退火温度为引物和模板结合时候的温度参数，当50%的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度·它是影响PCR特异性的较重要因素。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。
是否达到规定温度退火温度达到规定温度。大型法兰处理一般是采取固溶热处理，也就是人们平常所谓的“退火”，温度范围为1040~1120℃（日本标准）。你也可以通过退火炉观察孔观察，退火区的大型法兰管件应为白炽状态，但没出现软化下垂。
其次是炉体密封性（外壳有钢板和型钢焊接而成，台车由型钢及钢板焊接，台车通过与炉衬的软接触和沙封机构来减少热辐射及对流损失，有效保证炉体密封性。），光亮退火炉应是封闭的，与外界空气隔绝；采用氢气作保护气的，只有一个排气口是通的（用来点燃排出的氢气）。检查的方法可以用肥皂水抹在退火炉各个接头缝隙处，看是否跑气；其中最容易跑气的地方是退火炉进管子的地方和出管子的地方，这个地方的密封圈特别容易磨损，要经常检查经常换。
其次是保护气压力，为了防止出现微漏，炉内保护气应保持一定的正压，如果是氢气保护气，一般要求20kBar以上。退火气氛：一般都是采用纯氢作为退火气氛，气氛纯度是99.99%以上，如果气氛中另一部分是惰性气体的话，纯度也可以低一点，但是不能含有过多氧气、水汽。
